ٹیسٹ کا خلاصہ اور وضاحت
Visceral leishmaniasis, or Kala-azar, L. donovani کی کئی ذیلی اقسام کی وجہ سے پھیلنے والا انفیکشن ہے۔ورلڈ ہیلتھ آرگنائزیشن (ڈبلیو ایچ او) کے اندازے کے مطابق اس بیماری سے 88 ممالک میں تقریباً 12 ملین افراد متاثر ہوں گے۔یہ انسانوں میں Phlebotomus sandflies کے کاٹنے سے پھیلتا ہے، جو متاثرہ جانوروں کو کھانے سے انفیکشن حاصل کرتے ہیں۔اگرچہ یہ غریب ممالک میں پائی جانے والی بیماری ہے، لیکن جنوبی یورپ میں، یہ ایڈز کے مریضوں میں سب سے بڑا موقع پرست انفیکشن بن گیا ہے۔خون، بون میرو، جگر، لمف نوڈس یا تلی سے L. donovani جاندار کی شناخت تشخیص کا ایک یقینی ذریعہ فراہم کرتی ہے۔اینٹی ایل کا سیرولوجیکل پتہ لگانا۔ڈونووانی آئی جی ایم شدید ویسرل لیشمانیاسس کے لیے ایک بہترین مارکر پایا جاتا ہے۔کلینک میں استعمال ہونے والے ٹیسٹوں میں ELISA، فلوروسینٹ اینٹی باڈی یا ڈائریکٹ ایگلوٹینیشن ٹیسٹ 4-5 شامل ہیں۔حال ہی میں، ٹیسٹ میں L. donovani مخصوص پروٹین کے استعمال سے حساسیت اور مخصوصیت میں ڈرامائی طور پر بہتری آئی ہے۔
Leishmania IgG/IgM کومبو ریپڈ ٹیسٹ ایک ریکومبیننٹ پروٹین پر مبنی سیرولوجیکل ٹیسٹ ہے، جو بیک وقت L. Donovani کے IgG اور IgM اینٹی باڈیز کا پتہ لگاتا ہے۔ٹیسٹ بغیر کسی آلات کے 15 منٹ کے اندر قابل اعتماد نتیجہ فراہم کرتا ہے۔
اصول
لیشمینیا IgG/IgM ریپڈ ٹیسٹ ایک پس منظر کا بہاؤ کرومیٹوگرافک امیونواسے ہے۔ٹیسٹ کیسٹ پر مشتمل ہے: 1) ایک برگنڈی رنگ کا کنجوگیٹ پیڈ جس میں ریکومبیننٹ L. ڈونووانی اینٹیجن جو کہ کولائیڈ گولڈ (Leishmania conjugates) اور خرگوش IgG-گولڈ کنجوگیٹس پر مشتمل ہے، 2) ایک نائٹروسیلوز جھلی کی پٹی جس میں دو ٹیسٹ بینڈ اور T2 بینڈ (T2 بینڈ) شامل ہیں۔ اور ایک کنٹرول بینڈ (C بینڈ)۔اینٹی ایل کا پتہ لگانے کے لیے ٹی 1 بینڈ مونوکلونل اینٹی ہیومن آئی جی ایم کے ساتھ پہلے سے لیپت ہے۔donovani IgM، T2 بینڈ اینٹی L کا پتہ لگانے کے لیے ری ایجنٹس کے ساتھ پری کوٹڈ ہے۔donovani IgG، اور C بینڈ بکری مخالف خرگوش IgG کے ساتھ پری کوٹڈ ہے۔
جب کیسٹ کے نمونے کے کنویں میں جانچ کے نمونے کی مناسب مقدار بھیجی جاتی ہے، تو نمونہ پورے کیسٹ میں کیپلیری عمل کے ذریعے منتقل ہو جاتا ہے۔L. donovani IgM اگر نمونہ میں موجود ہو تو وہ لیشمینیا کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس جھلی پر پہلے سے کوٹیڈ اینٹی ہیومن آئی جی ایم اینٹی باڈی کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے برگنڈی رنگ کا T1 بینڈ بنتا ہے، جو L. donovani IgM مثبت ٹیسٹ کے نتائج کی نشاندہی کرتا ہے۔L. donovani IgG اگر نمونہ میں موجود ہو تو لیشمینیا کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو جھلی پر پہلے سے لیپت ری ایجنٹس کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کا T2 بینڈ بنتا ہے، جو L. donovani IgG مثبت ٹیسٹ کے نتائج کی نشاندہی کرتا ہے۔
کسی بھی ٹی بینڈ (T1 اور T2) کی عدم موجودگی منفی نتیجہ بتاتی ہے۔ٹیسٹ میں ایک اندرونی کنٹرول (C بینڈ) ہوتا ہے جس میں بکرے کے مخالف خرگوش IgG/rabbit IgG-گولڈ کنجوگیٹ کے امیونو کمپلیکس کے برگنڈی رنگ کے بینڈ کی نمائش ہوتی ہے چاہے کسی بھی ٹی بینڈ پر رنگ کی نشوونما ہو۔بصورت دیگر، ٹیسٹ کا نتیجہ غلط ہے اور نمونہ کو کسی دوسرے آلے سے دوبارہ جانچنا ضروری ہے۔
