ملیریا پی ایف/پین اینٹیجن ریپڈ ٹیسٹ کٹ (کولائیڈل گولڈ)

ملیریا ایک مچھر سے پیدا ہونے والی، ہیمولیٹک، بخار کی بیماری ہے جو 200 ملین سے زیادہ لوگوں کو متاثر کرتی ہے اور ہر سال 1 ملین سے زیادہ افراد کو ہلاک کرتی ہے۔یہ پلازموڈیم کی چار اقسام کی وجہ سے ہوتا ہے: P. falciparum، P. vivax، P. ovale، اور P. ملیریا۔یہ پلازموڈیا تمام انسانوں کے erythrocytes کو متاثر اور تباہ کرتے ہیں، جس سے سردی لگتی ہے، بخار، خون کی کمی اور splenomegaly پیدا ہوتا ہے۔P. فالسیپیرم دیگر پلازموڈیل پرجاتیوں کے مقابلے میں زیادہ شدید بیماری کا سبب بنتا ہے اور ملیریا سے ہونے والی زیادہ تر اموات کا سبب بنتا ہے۔P. falciparum اور P. vivax سب سے عام پیتھوجینز ہیں، تاہم، پرجاتیوں کی تقسیم میں کافی جغرافیائی تغیر پایا جاتا ہے۔

روایتی طور پر، ملیریا کی تشخیص جیمزا پر موجود جانداروں کے پردیی خون کے داغ دار موٹے داغوں سے ہوتی ہے، اور پلازموڈیم کی مختلف انواع کو متاثرہ erythrocytes1 میں ان کی ظاہری شکل سے پہچانا جاتا ہے۔یہ تکنیک درست اور قابل بھروسہ تشخیص کی صلاحیت رکھتی ہے، لیکن صرف اس صورت میں جب ہنر مند مائکروسکوپسٹ کی طرف سے طے شدہ پروٹوکول 2 کا استعمال کیا جائے، جو دنیا کے دور دراز اور غریب علاقوں کے لیے بڑی رکاوٹیں پیش کرتا ہے۔

ملیریا Pf/Pan Antigen Rapid Test Kit ان رکاوٹوں کو حل کرنے کے لیے تیار کی گئی ہے۔اس ٹیسٹ میں P. فالسیپیرم مخصوص پروٹین کے لیے مونوکلونل اور پولی کلونل اینٹی باڈیز کا ایک جوڑا، ہسٹیڈائن ریپیٹ پروٹین II (pHRP-II)، اور پلازموڈیم لییکٹیٹ ڈیہائیڈروجنیز (pLDH) کے لیے مونوکلونل اینٹی باڈیز کا ایک جوڑا استعمال کیا جاتا ہے، یہ ایک پروٹین ہے جو P. فالسیپیرم کی چار انواع کے ذریعے تیار کیا جاتا ہے، جس میں پلاسموڈیم کی مختلف اقسام کا پتہ لگانے کے قابل ہے۔ فالسیپیرم اور یا دیگر تین پلاسموڈیا میں سے کوئی بھی۔یہ لیبارٹری کے آلات کے بغیر، غیر تربیت یافتہ یا کم سے کم ہنر مند اہلکار انجام دے سکتے ہیں۔

پی ایف/پین ملیریا ریپڈ ٹیسٹ کٹ ایک لیٹرل فلو کرومیٹوگرافک امیونوسے ہے۔ٹیسٹ سٹرپ کے اجزاء پر مشتمل ہوتا ہے: 1) ایک برگنڈی رنگ کا کنجوگیٹ پیڈ جس میں ماؤس اینٹی pHRP-II اینٹی باڈی ہے جس میں کولائیڈ گولڈ (pHRP II-گولڈ کنجوگیٹس) اور ماؤس اینٹی pLDH اینٹی باڈی کولائیڈ گولڈ (pLDH-گولڈ کنجوگیٹس) کے ساتھ مل جاتی ہے۔

2) نائٹروسیلوز جھلی کی پٹی جس میں دو ٹیسٹ بینڈ (پین اور پی وی بینڈ) اور ایک کنٹرول بینڈ (سی بینڈ) ہوتے ہیں۔پین بینڈ مونوکلونل اینٹی pLDH اینٹی باڈی کے ساتھ پہلے سے کوٹڈ ہے جس کے ذریعے پلازموڈیا کی چار اقسام میں سے کسی کے ساتھ انفیکشن کا پتہ لگایا جا سکتا ہے، Pf بینڈ کو Pf انفیکشن کا پتہ لگانے کے لیے پولی کلونل اینٹی pHRP-II اینٹی باڈیز کے ساتھ پہلے سے لیپت کیا جاتا ہے، اور C بینڈ کو بکری مخالف ماؤس IgG کے ساتھ لیپت کیا جاتا ہے۔

پرکھ کے دوران، خون کے نمونے کی مناسب مقدار ٹیسٹ کیسٹ کے نمونے کے کنویں (S) میں بھیجی جاتی ہے، بفر ویل (B) میں ایک لیسز بفر شامل کیا جاتا ہے۔بفر میں ایک صابن ہوتا ہے جو خون کے سرخ خلیوں کو لیز کرتا ہے اور مختلف پلازموڈیم اینٹیجنز جاری کرتا ہے، جو کیسٹ میں رکھی پٹی میں کیپلیری عمل کے ذریعے منتقل ہوتے ہیں۔pHRP-II اگر نمونہ میں پیش کیا جائے تو pHRP II-گولڈ کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو جھلی پر پری لیپت اینٹی pHRPII اینٹی باڈیز کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے برگنڈی رنگ کا Pf بینڈ بنتا ہے، جو Pf مثبت ٹیسٹ کے نتیجے کی نشاندہی کرتا ہے۔pLDH اگر نمونے میں پیش کرتا ہے تو pLDH گولڈ کنجوگیٹس سے منسلک ہو جائے گا۔اس کے بعد امیونو کمپلیکس کو جھلی پر پری لیپت اینٹی pLDH اینٹی باڈی کے ذریعے پکڑا جاتا ہے، جس سے ایک برگنڈی رنگ کا پین بینڈ بنتا ہے، جو پلازموڈیم مثبت ٹیسٹ کے نتیجے کی نشاندہی کرتا ہے۔پین بینڈ کی غیر موجودگی میں، دیگر تین پلاسموڈیا میں سے کسی کے لیے بھی مثبت ٹیسٹ کے نتائج کی سفارش کی جا سکتی ہے۔

کسی بھی ٹیسٹ بینڈ (پین اور پی ایف) کی غیر موجودگی منفی نتیجہ بتاتی ہے۔ٹیسٹ میں ایک اندرونی کنٹرول (C بینڈ) ہوتا ہے جس میں بکرے کے اینٹی ماؤس IgG/mouse IgG (pHRP-II اور pLDH-گولڈ کنجوگیٹس) کے امیونو کمپلیکس کے برگنڈی رنگ کے بینڈ کی نمائش ہونی چاہیے، قطع نظر اس کے کہ کسی بھی ٹیسٹ بینڈ پر رنگ کی نشوونما ہو۔بصورت دیگر، ٹیسٹ کا نتیجہ غلط ہے اور نمونہ کو کسی دوسرے آلے سے دوبارہ جانچنا ضروری ہے۔